概念
懸尾實(shí)驗(yàn)(Tail suspension test, TST)是一種經(jīng)典而又能快速評(píng)價(jià)抗抑郁藥物、興奮藥物、鎮(zhèn)靜藥物藥效的方法。其原理是利用小鼠懸尾后企圖逃脫但又無(wú)法逃脫,從而放棄掙扎,進(jìn)入特有的抑郁不動(dòng)狀態(tài),實(shí)驗(yàn)過(guò)程中記錄動(dòng)物不動(dòng)時(shí)間來(lái)反映抑郁狀態(tài),抗抑郁藥物、興奮藥物能明顯地縮短改變其狀態(tài)。
實(shí)驗(yàn)流程
適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境:將小鼠從SPF飼養(yǎng)環(huán)境中取出,并讓其在實(shí)驗(yàn)環(huán)境中適應(yīng)10-15分鐘。
固定小鼠尾巴:輕輕將小鼠拎起,將其尾巴固定在實(shí)驗(yàn)架上。
懸空小鼠:將小鼠懸空5-6分鐘。在這段時(shí)間內(nèi),小鼠會(huì)表現(xiàn)出不同的行為反應(yīng),這些反應(yīng)將用于后續(xù)的數(shù)據(jù)分析。
觀察并記錄行為:在懸空期間,密切觀察小鼠的行為表現(xiàn)并記錄。這些行為包括但不限于運(yùn)動(dòng)、掙扎、縮卷等。
評(píng)估焦慮抑郁行為水平:根據(jù)小鼠在懸空期間表現(xiàn)出的行為反應(yīng),評(píng)估其焦慮抑郁行為水平(不同行為反應(yīng)對(duì)應(yīng)不同程度的焦慮或抑郁狀態(tài))。
評(píng)價(jià)指標(biāo)
1.肢體不動(dòng)不掙扎
當(dāng)其停止掙扎,身體保持垂直倒懸狀態(tài),靜止不動(dòng),這個(gè)指標(biāo)可視為實(shí)驗(yàn)小鼠出現(xiàn)習(xí)得性無(wú)助后放棄掙扎的行為表現(xiàn)。小鼠在懸尾實(shí)驗(yàn)中的不動(dòng)時(shí)間越長(zhǎng),表明其抑郁的程度越重。
2.肢體掙扎行為
如果小鼠在懸尾實(shí)驗(yàn)中的掙扎時(shí)間較短,那么它們?cè)诿媾R挑戰(zhàn)時(shí)可能缺乏足夠的動(dòng)力和興趣去嘗試擺脫困境。這種缺乏積極性的行為被認(rèn)為是抑郁癥狀的一個(gè)標(biāo)志。
運(yùn)動(dòng)活躍度:
正常情況:小鼠在懸空時(shí),通常會(huì)表現(xiàn)出一定的運(yùn)動(dòng)活躍度,如嘗試移動(dòng)、調(diào)整姿勢(shì)等。
焦慮抑郁小鼠:小鼠在實(shí)驗(yàn)期間運(yùn)動(dòng)活躍度明顯減少,它們可能會(huì)縮成一團(tuán)或者幾乎不動(dòng)。這反映了它們恐懼、不安或抑郁狀態(tài),導(dǎo)致它們?nèi)狈μ剿骰蛱颖艿膭?dòng)機(jī)。
掙扎反應(yīng):
正常情況:小鼠在不適或受到威脅時(shí),會(huì)表現(xiàn)出掙扎反應(yīng),以嘗試擺脫不利環(huán)境。
焦慮抑郁小鼠:實(shí)驗(yàn)時(shí)掙扎反應(yīng)增強(qiáng),表現(xiàn)出大量掙扎和抖動(dòng)。這可能表明它們感到更加不適或恐慌,并試圖通過(guò)掙扎來(lái)逃避這種情境。
跳躍反應(yīng):
正常情況:小鼠在需要逃避或探索時(shí),可能會(huì)表現(xiàn)出跳躍反應(yīng)。
焦慮抑郁小鼠:實(shí)驗(yàn)時(shí)跳躍反應(yīng)明顯減少。這可能意味著它們?nèi)狈μS的動(dòng)機(jī)或能力,反映了它們的抑郁或焦慮狀態(tài)。
尾巴卷曲:
正常情況:小鼠尾巴通常保持相對(duì)直的狀態(tài),或在特定情況下(如放松或好奇)可能輕微卷曲。
焦慮抑郁小鼠:實(shí)驗(yàn)期間尾巴卷曲程度明顯增強(qiáng)。尾巴卷曲可能是小鼠在緊張或不安時(shí)的一種自我保護(hù)行為,也可能反映了它們的焦慮或抑郁情緒。
注意事項(xiàng)
1.實(shí)驗(yàn)環(huán)境應(yīng)保持安靜,突然大或者一直持續(xù)的噪音會(huì)使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物驚慌失措。
2.實(shí)驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)建議不超過(guò)6分鐘,避免時(shí)間過(guò)長(zhǎng)對(duì)小鼠造成過(guò)度壓力。
3.底部建議放置一個(gè)可拆卸的拖盤,收集糞便或尿液。
4.選擇同批次、同齡、同種類、同性別的小鼠,以減少個(gè)體差異對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。
5.分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)時(shí),需要考慮實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組之間的差異,以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)論的可靠性。
實(shí)驗(yàn)應(yīng)用
懸尾試驗(yàn)是一種用于評(píng)估急性抑郁癥狀的有效方法這種實(shí)驗(yàn)?zāi)P统S糜谝钟舭Y的研究和抗抑郁藥物的開(kāi)發(fā)過(guò)程中。這種方法已經(jīng)被用于評(píng)估多種類型的抗抑郁藥物,包括三環(huán)類藥物、選擇性血清素再攝取抑制劑(SSRI)、單胺氧化酶抑制劑(MAOI)、精神興奮藥、鎮(zhèn)定藥以及抗焦慮藥。同時(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以為神經(jīng)科學(xué)、心理學(xué)、藥物研究等領(lǐng)域提供有價(jià)值的數(shù)據(jù)和啟示。