服務(wù)介紹:
慢性支氣管炎(chronic bronchitis,CB)是指氣管、支氣管粘膜及其周圍組織的慢性非特異性炎癥,臨床上以長期咳痰或伴有喘息及反復(fù)發(fā)作為特征。建立慢性支氣管炎動物模型能模擬慢性支氣管炎的發(fā)病因素、病理過程和臨床特征,研究慢性支氣管炎的發(fā)病機(jī)制及防治方法。動物模型作為實(shí)驗(yàn)室的體外研究與人類發(fā)病研究之間的橋梁,對很多疾病的臨床狀態(tài)研究有非常重要的作用,同時也為新型藥物的開發(fā)和療效評價提供了新的方法,為今后更安全合理的進(jìn)行臨床研究提供了有效的方法。
造模方法
1. 化學(xué)藥物法
(1) 使小鼠吸入含SO2(濃度為2%)的空氣,每日10秒,14~18天后小鼠即出現(xiàn)支氣管炎病變,27天后出現(xiàn)重度支氣管炎病變,總觀察時間為97天。
(2) 使小鼠吸入含Cl2(濃度為0.001~0.O04mg/L)的空氣,每日25~30分鐘,35天后小鼠可出現(xiàn)慢性支氣管炎病變,總觀察時間為50天。
(3) 用含氨.氣的空氣以每15~20分鐘重復(fù)刺激1次,每次2~3分鐘,刺激一天共8次,32天后可出現(xiàn)慢性支氣管炎癥狀,總觀察時間為100天。
(4) 氣管內(nèi)注射脂多糖法:大鼠用1%戊巴bi妥鈉腹腔注射麻醉,仰臥位固定于操作臺,拉出舌體,暴露聲門,快速將套管插入氣管,將脂多糖200μg/200μl注入氣管。飼養(yǎng)4周,制備大鼠慢性支氣管炎模型。
2. 細(xì)菌感染法
(1) 使用雞胚液培育流感病毒,選取培育48小時的雞胚液,單位為1:320;流感桿菌為18~24小時的培養(yǎng)物,菌液濃度為7×100000000ml,小鼠在乙mi麻醉狀態(tài)下,將感染材料滴鼻(0.03ml/只),于3~6天出現(xiàn)氣管上皮輕度壞死,35天后表現(xiàn)為典型的慢性支氣管炎癥狀。
(2) 用流感桿菌9億/ml、甲型鏈球菌6億/ ml、卡他性炎性菌9億/ml、肺炎雙球菌6億/ml、以4:3:2:1混合菌液在麻醉下對大鼠進(jìn)行滴鼻0.1ml,每周1次,6周有形成慢性支氣管炎的趨勢,但程度很輕。
(3) 將豚鼠置于7~8℃環(huán)境中1小時,隔天1次,45天后改為每周2次,同時加細(xì)菌(8種)混合菌液滴鼻0.2ml,150天可形成亞急性乃至慢性支氣管炎病變。
3. 被動吸煙法
(1) 煙霧致大鼠慢性支氣管炎法:將大鼠置于27立方米煙室內(nèi),用混合煙150~200mg/立方米(200g鋸末、15~20g煙葉、6~7g辣椒及1g硫黃混合,20~30分鐘內(nèi)燒化,顆粒在0.5~1μm以上)吸入,每周6次,44天即可形成慢性支氣管炎病變。
(2) 用香煙1支半,在21L容器內(nèi)燃化共10分鐘,換氣5分鐘后,再用1支香煙燒化,重熏10分鐘。將豚鼠置于這種煙霧環(huán)境中,每天1次,每周6次,同時置于7~8℃環(huán)境中1小時,隔天1次,45天后改為每周2次,28~35天可出現(xiàn)慢性支氣管炎病變,6周后病變保持并逐漸加重。
模型特點(diǎn):吸入SO2所致的慢性支氣管炎動物模型具有如下特點(diǎn):
①小鼠出現(xiàn)刺激性咳嗽,體重不增,少數(shù)死亡。支氣管病理學(xué)改變:早期為急性炎癥改變,12天后出現(xiàn)淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞浸潤,繼而支氣管周圍結(jié)締組織增生,27天后顯示重度慢性氣管炎病變。
②大鼠氣管腔內(nèi)黏液阻塞,氣管上皮壞死糜爛,杯狀細(xì)胞增生,氣管壁平滑肌增生,肺泡腔擴(kuò)大,部分融合形成肺大皰。運(yùn)用這種方法也復(fù)制出穩(wěn)定可靠的動物模型。也可觀察到氣道和肺組織毒蕈堿型受體(M受體)的數(shù)量及功能無改變。
對于細(xì)菌感染所致的支氣管炎,感染后2天小鼠出現(xiàn)毛松、咳嗽、神萎、食欲缺乏等;3~6天出現(xiàn)氣管上皮輕度壞死,杯狀細(xì)胞數(shù)目初期下降,10天后逐漸增加,35天后表現(xiàn)為典型的慢性支氣管炎癥狀,50天后即恢復(fù)正常。
氣管滴注脂多糖后21天,大鼠出現(xiàn)倦怠、毛發(fā)失去光澤,進(jìn)食、飲水減少等表現(xiàn),氣管與支氣管上皮脫落,杯狀細(xì)胞增生,黏液腺增生肥大,氣管、支氣管壁見慢性炎癥細(xì)胞浸潤,管壁增厚,管腔充滿黏液及大量以中性粒細(xì)胞為主的炎癥細(xì)胞,氣管平滑肌增生肥厚。
對于煙霧致大鼠慢性支氣管炎而言,隨煙霧刺激時間的增加,大鼠氣管炎癥病損逐漸加重,至第7周形成慢性支氣管炎典型變化。其氣管炎癥細(xì)胞的特點(diǎn)是:初期以巨噬細(xì)胞為主,隨后以淋巴細(xì)胞為主,中性粒細(xì)胞僅在接觸煙霧的早期短時間內(nèi)出現(xiàn)較高水平。