服務(wù)介紹:
心肌梗死(myocardial infarction,MI)是一種嚴(yán)重的心血管疾病,由于冠狀動(dòng)脈部分或完全閉阻塞,導(dǎo)致血液循環(huán)障礙,導(dǎo)致部分心肌因持久性缺血缺氧而發(fā)生局部壞死。 心肌無(wú)法得到足夠氧氣,最終導(dǎo)致心肌不可逆的缺血性壞死,心臟的收縮和舒張功能障礙,機(jī)體供血不足,是一種急性且嚴(yán)重的心臟狀態(tài),嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致死亡的發(fā)生。 心肌梗死是嚴(yán)重威脅人類健康的心血管疾病,也是主要的致死因素之一。在心血管疾病研究中,動(dòng)物模型被廣泛用于發(fā)病機(jī)制和藥物研發(fā)的探索。
動(dòng)物品系選擇:SD大鼠,雄性
造模方法:
1、腹腔注射麻醉,用大鼠剃毛器剃除小鼠胸部及腋下毛發(fā)(充分暴露手術(shù)區(qū)),用碘酒和75%乙醇手術(shù)區(qū)消毒。
2、氣管插管:打開(kāi)呼吸機(jī),設(shè)置好各參數(shù)(呼吸頻率110bpm),將氣管插管沿聲門插入氣管,接上呼吸機(jī),觀察大鼠呼吸狀況,胸闊起伏與呼吸機(jī)頻率一致表示插管成功,即可進(jìn)行MI手術(shù)。
3、大鼠采用正臥位,用眼科剪打開(kāi)胸腔充分暴露心臟,顯微直鑷輕輕夾起少量心包并于左心耳下撕開(kāi)少許心包,充分暴露左冠狀動(dòng)脈前降支(LAD)或所在區(qū)域。
4、結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降:找到LAD走向或可能所在位置,持針器持取7-0帶針縫合線,于左心耳下緣2mm處進(jìn)針,縫線穿過(guò)LAD,以完全阻斷LAD血流。
5、關(guān)胸:結(jié)扎完后,縫合胸腔開(kāi)口(保證無(wú)縫隙,無(wú)錯(cuò)位)關(guān)閉胸腔,由內(nèi)向外逐層縫合各層肌肉和皮膚。
6、術(shù)后管理:術(shù)后密切關(guān)注大鼠狀態(tài),有無(wú)呼吸異常等。待大鼠自然蘇醒后將小鼠從呼吸機(jī)上取下并取下氣管插管,正常飼養(yǎng)。
模型評(píng)價(jià)
(1)心臟功能評(píng)價(jià)
由Laplace定理可知:S=Pr/2h,P為心室內(nèi)壓,r為心腔內(nèi)徑,h為心壁厚度。在心臟壓力負(fù)荷過(guò)重的情況下,為適應(yīng)心臟做功增加,室壁厚度增加,左室室壁應(yīng)力增加,提高心臟收縮功能起到早去代償?shù)臋C(jī)制;最終發(fā)展為慢性心力衰竭甚或心源性猝死??赏ㄟ^(guò)超聲或血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)來(lái)評(píng)價(jià)心功能。M超圖像,測(cè)量左室舒張末期及收縮末期內(nèi)徑(LVIDd、LVIDs),同時(shí)系統(tǒng)將會(huì)自動(dòng)計(jì)算出相應(yīng)的射血分?jǐn)?shù)EF%及左室短軸縮短率(FS%)。
(2)TTC染色測(cè)量梗死面積
迅速取下心臟,清潔并擠壓心臟蘸干血漬,4°C生理鹽水沖洗干凈后蘸干,于-20°C冰箱冷凍15min至心臟變硬,取出并用刀片自心尖向心底沿房室溝方向切成1mm厚切片,共切5片,迅速將切片置于5ml 37°C 1% PH為7.4的TTC磷酸緩沖液中,水浴15min,TTC染色后梗死區(qū)為白色,梗死邊緣區(qū)為磚紅色,正常區(qū)為紅色。
(3)病理學(xué)評(píng)價(jià)
取出心臟,剔除血管、脂肪等雜質(zhì),心臟放紗布上蘸干殘留的血漬和溶液并稱重后放入4%多聚甲醛溶液中保存,24h后行脫水、包埋、石蠟切片,各個(gè)標(biāo)本選擇固定位置(乳頭肌水平)切片,做HE染色。HE 染色結(jié)果可見(jiàn),對(duì)照組心肌排列整齊、細(xì)胞質(zhì)豐富均勻、間質(zhì)正常;模型組部分心肌細(xì)胞核丟失、心肌細(xì)胞呈空泡樣變、梗死區(qū)可見(jiàn)心肌組織紊亂、梗死區(qū)心肌細(xì)胞消失,代之以纖維瘢痕組織。