實(shí)驗(yàn)背景:
缺血再灌注損傷(Ischemia-Reperfusion injury, IRI)是指當(dāng)一個(gè)組織或器官因供血不足而處于缺血狀態(tài),再次獲得血液供應(yīng)時(shí)反而出現(xiàn)嚴(yán)重?fù)p傷的病理現(xiàn)象。IRI常發(fā)生于心臟相關(guān)手術(shù)后,被稱為心肌缺血再灌注(myocardial ischemic reperfusion injury,MIRI)。冠狀動(dòng)脈成形術(shù)、冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)(CABG)、溶栓治療或原發(fā)性經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療(PPCI)等心梗治療方法均有可能會(huì)發(fā)生MIRI。MIRI是影響患者預(yù)后、增加梗死面積和促進(jìn)長(zhǎng)期不良心臟重構(gòu)的關(guān)鍵因素。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇:體重250-350g,雄性Wistar大鼠,
實(shí)驗(yàn)方法:用3% 按30mg/kg體重的劑量腹腔注射麻醉,仰臥固定于手術(shù)臺(tái)上,將針狀電極插入大鼠四肢皮下連接心電圖機(jī),記錄標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ?qū)?lián)心電圖,用大半個(gè)橡皮球(大小正好套住大鼠頭頸部)連續(xù)呼吸機(jī)進(jìn)行人工呼吸,呼吸頻率90次/min,潮氣量10-12ml/kg,呼吸比設(shè)為1:1。
去除左前胸毛發(fā),消毒鋪巾,順肋間隙方向于胸骨左旁第3、第4肋間切開(kāi)皮膚,長(zhǎng)約1cm,逐層分離皮下組織、肌肉,于第3、第4肋骨間撐開(kāi)進(jìn)胸,
向右上方推開(kāi)胸腺,可暴露心臟及大血管根部,切開(kāi)心包,輕輕擠大鼠胸廓,將心臟擠出,或做一個(gè)和心臟直徑一般大小的肺動(dòng)脈圓錐間可以看見(jiàn)左冠脈前降支起始部,用無(wú)損傷縫針,進(jìn)針深度控制在0.1cm,寬度為0.1-0.2cm;回納心臟入胸廓,待動(dòng)物的數(shù)十次心動(dòng)周期后,收線結(jié)扎;
觀察數(shù)分鐘后,徹底止血后逐層關(guān)胸。關(guān)胸過(guò)程中于切口內(nèi)放置排氣管,閉胸畢,抽空胸腔積氣后拔除排氣管。恢復(fù)大鼠自主呼吸,清除氣管內(nèi)分泌物,氣管切口及頸部切口開(kāi)放,不作縫合。
手術(shù)過(guò)程中分別于開(kāi)胸后、縫針后、結(jié)扎后和閉胸后4個(gè)點(diǎn)記錄心電圖變化;合格動(dòng)物2周及6周后均復(fù)查心電圖。
注意:以上手術(shù)均在嚴(yán)格無(wú)菌條件下進(jìn)行。術(shù)后肌內(nèi)注射青霉素鈉2×105U/d,連續(xù)注射5d以防感染。