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實(shí)驗(yàn)背景：抑郁癥（depression，Dep）是最常見的情感障礙，具有高發(fā)病率、高復(fù)發(fā)率和高致殘率，其典型癥狀包括情緒低落、興趣喪失、快感缺失、認(rèn)知障礙、社交障礙、睡眠紊亂和軀體癥狀等，嚴(yán)重可致自殺。抑郁癥病因及病理機(jī)制復(fù)雜，現(xiàn)有的任一假說(shuō)都無(wú)法全面揭示抑郁癥發(fā)病機(jī)制。目前抑郁癥的動(dòng)物模型可根據(jù)其建模手段分為應(yīng)激模型、藥理學(xué)模型、轉(zhuǎn)基因模型和手術(shù)損傷模型。
(一)神經(jīng)生化功能改變模型
方法一
1. 造模材料
動(dòng)物：健康純種小鼠，雄性，4～5周齡；藥物：利舍平。
2. 造模方法
于小鼠尾靜脈注射2mg/kg利舍平后觀察10h。
3. 造模原理
利用利舍平的拮抗作用建立抑郁癥動(dòng)物模型。
4. 造模后一般變化
在注射利舍平后半小時(shí)出現(xiàn)眼瞼下垂，1h后出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)不能，不能超出直徑5cm的范圍，身體蜷縮，受到外界刺激反應(yīng)遲緩。
5. 造模后生化變化
對(duì)照組小鼠腦內(nèi)去甲腎上腺素(norepinephrine, NE)、5-HT含量分別為(220.90±3.40)ng/(ml·g)，(390.99±6.93)ng/(ml·g)；造模組小鼠腦內(nèi) NE、5-HT含量分別為(176.03±2.70)ng/(ml·g)，(174.98±9.32)ng/(ml·g)，兩組間存在顯著性差異。
方法二
1. 造模材料
動(dòng)物：健康純種小鼠，雄性，4～5周齡；
藥物：利舍平；器械：水槽。
2. 造模方法
于尾靜脈注射半量利舍平(1mg/kg)，然后將小鼠四肢綁扎固定于木板，浸入20℃左右水槽中，水面深至劍突部位，持續(xù)浸泡10h后，將其取出觀察。
3. 造模原理
利用環(huán)境刺激造成應(yīng)激狀態(tài)后加半量利舍平造成抑郁動(dòng)物模型。
4. 造模后一般變化
造模初期出現(xiàn)急躁、焦慮、煩躁、憤怒的表現(xiàn)。隨著造模時(shí)間的延續(xù)，小鼠表現(xiàn)為倦怠、受到外界刺激反應(yīng)遲緩，活動(dòng)范圍縮小，逐漸至直徑為5cm的范圍內(nèi)。
5. 造模后生化變化
對(duì)照組小鼠腦內(nèi)NE、5-HT含量分別為(220.90±3.40)ng/(ml·g)，(390.99±6.93)ng/(ml·g)；造模組小鼠腦內(nèi)NE、5-HT含量分別為(179.89±2.70)ng/(ml·g)，(176.96±9.25)ng/(ml·g)，兩組間存在顯著性差異。
(二)腦卒中后抑郁狀態(tài)動(dòng)物模型
1. 造模材料
動(dòng)物：雄性Wistar大鼠，體重250～300g；
藥物：麻醉劑，生理鹽水；器械：止血鉗，振蕩器。
2. 造模方法
在10％水合氯醛(400mg/kg)麻醉下，剪開大鼠頭部皮膚，暴露顱骨，應(yīng)用牙科鉆分別在左側(cè)顱骨鉆6個(gè)孔，用眼科剪翻開左側(cè)顱骨，暴露左側(cè)腦硬腦膜，用虹膜剪輕輕剪開硬腦膜，露出軟腦膜，使用蘸了生理鹽水的棉簽輕輕擦拭(在手術(shù)顯微鏡下)，至鏡下見不到血管為止，縫合皮膚。
將動(dòng)物予以?shī)A尾1min、禁水24h、禁食24h、45℃環(huán)境5min、晝夜顛倒24h、水平振蕩30min(160次/min)、4℃冰水游泳5min等方法刺激。這7種刺激每天隨機(jī)采取一種，共安排3周。即包括：3次24h禁食，3次24h禁水，3次晝夜顛倒，3次4℃冰水游泳5min，3次45℃烘箱熱烘5min，3次夾尾1min，3次30min高速水平振蕩(160次/min)。
每種刺激的操作方法如下：
(1) 禁食：24h斷料，即早7：00至次日早7：00不喂食。
(2) 禁水：24h斷水，即早7：00至次日早7：00不喂水。
(3) 晝夜顛倒：于早7：00將動(dòng)物放入晝夜顛倒箱中，不開燈使動(dòng)物處于黑暗狀態(tài)；至晚19：00將晝夜顛倒箱的日光燈打開，使動(dòng)物處于光照狀態(tài)，直至次日早7：00取出。
(4) 冰水游泳：將動(dòng)物放入盛有4℃冰水的桶中(水深15cm)，大鼠的后足尖剛能觸 及桶底，5min后將動(dòng)物取出放回籠中。
(5) 熱烘：烘箱溫度調(diào)至45℃恒定，將動(dòng)物放入烘箱中，5min后將動(dòng)物取出。
(6) 夾尾：將大鼠放入固定籠中，露出尾部，用止血鉗夾住距尾根1cm處(用力不要過(guò)大，使大鼠發(fā)出哀叫即可)持續(xù)1min后，將大鼠拉出放回籠中。
(7) 振蕩：將大鼠放入振蕩器中，高速(160次/min)水平振蕩30min后取出。 將動(dòng)物單籠飼養(yǎng)。
3. 造模原理 去除大鼠腦左側(cè)皮層血管建立腦缺血模型，在此基礎(chǔ)上加用孤養(yǎng)法和慢性不可預(yù)見的溫和性應(yīng)激方法，造成腦卒中后抑郁狀態(tài)動(dòng)物模型。
4. 造模后變化
麻醉清醒后即出現(xiàn)了病灶對(duì)側(cè)肢體輕度功能障礙；術(shù)后1～2周出現(xiàn)易激惹；術(shù)后1周肢體功能有所恢復(fù)；術(shù)后3周，即慢性應(yīng)激2周后出現(xiàn)活動(dòng)減少，常蜷縮少動(dòng)，快感缺乏，提示卒中后抑郁(post stroke depression, PSD)大鼠模型已建立。
5. 注意事項(xiàng)
手術(shù)器械嚴(yán)格消毒，防止手術(shù)感染，手術(shù)創(chuàng)傷應(yīng)盡可能小，嚴(yán)格無(wú)菌操作。飼養(yǎng)室內(nèi)盡可能保持動(dòng)物的最適溫度、濕度。
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