概念
懸尾實驗(Tail suspension test, TST)是一種經(jīng)典而又能快速評價抗抑郁藥物、興奮藥物、鎮(zhèn)靜藥物藥效的方法。其原理是利用小鼠懸尾后企圖逃脫但又無法逃脫,從而放棄掙扎,進入特有的抑郁不動狀態(tài),實驗過程中記錄動物不動時間來反映抑郁狀態(tài),抗抑郁藥物、興奮藥物能明顯地縮短改變其狀態(tài)。
懸尾
強迫游泳
實驗流程
適應(yīng)實驗環(huán)境:將小鼠從SPF飼養(yǎng)環(huán)境中取出,并讓其在實驗環(huán)境中適應(yīng)10-15分鐘。
固定小鼠尾巴:輕輕將小鼠拎起,將其尾巴固定在實驗架上。
懸空小鼠:將小鼠懸空5-6分鐘。在這段時間內(nèi),小鼠會表現(xiàn)出不同的行為反應(yīng),這些反應(yīng)將用于后續(xù)的數(shù)據(jù)分析。
觀察并記錄行為:在懸空期間,密切觀察小鼠的行為表現(xiàn)并記錄。這些行為包括但不限于運動、掙扎、縮卷等。
評估焦慮抑郁行為水平:根據(jù)小鼠在懸空期間表現(xiàn)出的行為反應(yīng),評估其焦慮抑郁行為水平(不同行為反應(yīng)對應(yīng)不同程度的焦慮或抑郁狀態(tài))。
評價指標
1.肢體不動不掙扎
當其停止掙扎,身體保持垂直倒懸狀態(tài),靜止不動,這個指標可視為實驗小鼠出現(xiàn)習得性無助后放棄掙扎的行為表現(xiàn)。小鼠在懸尾實驗中的不動時間越長,表明其抑郁的程度越重。
2.肢體掙扎行為
如果小鼠在懸尾實驗中的掙扎時間較短,那么它們在面臨挑戰(zhàn)時可能缺乏足夠的動力和興趣去嘗試擺脫困境。這種缺乏積極性的行為被認為是抑郁癥狀的一個標志。
運動活躍度:
正常情況:小鼠在懸空時,通常會表現(xiàn)出一定的運動活躍度,如嘗試移動、調(diào)整姿勢等。
焦慮抑郁小鼠:小鼠在實驗期間運動活躍度明顯減少,它們可能會縮成一團或者幾乎不動。這反映了它們恐懼、不安或抑郁狀態(tài),導致它們?nèi)狈μ剿骰蛱颖艿膭訖C。
掙扎反應(yīng):
正常情況:小鼠在不適或受到威脅時,會表現(xiàn)出掙扎反應(yīng),以嘗試擺脫不利環(huán)境。
焦慮抑郁小鼠:實驗時掙扎反應(yīng)增強,表現(xiàn)出大量掙扎和抖動。這可能表明它們感到更加不適或恐慌,并試圖通過掙扎來逃避這種情境。
跳躍反應(yīng):
正常情況:小鼠在需要逃避或探索時,可能會表現(xiàn)出跳躍反應(yīng)。
焦慮抑郁小鼠:實驗時跳躍反應(yīng)明顯減少。這可能意味著它們?nèi)狈μS的動機或能力,反映了它們的抑郁或焦慮狀態(tài)。
尾巴卷曲:
正常情況:小鼠尾巴通常保持相對直的狀態(tài),或在特定情況下(如放松或好奇)可能輕微卷曲。
焦慮抑郁小鼠:實驗期間尾巴卷曲程度明顯增強。尾巴卷曲可能是小鼠在緊張或不安時的一種自我保護行為,也可能反映了它們的焦慮或抑郁情緒。
注意事項
1.實驗環(huán)境應(yīng)保持安靜,突然大或者一直持續(xù)的噪音會使實驗動物驚慌失措。
2.實驗時長建議不超過6分鐘,避免時間過長對小鼠造成過度壓力。
3.底部建議放置一個可拆卸的拖盤,收集糞便或尿液。
4.選擇同批次、同齡、同種類、同性別的小鼠,以減少個體差異對實驗結(jié)果的影響。
5.分析實驗數(shù)據(jù)時,需要考慮實驗組和對照組之間的差異,以確保實驗結(jié)論的可靠性。
實驗應(yīng)用
懸尾試驗是一種用于評估急性抑郁癥狀的有效方法這種實驗?zāi)P统S糜谝钟舭Y的研究和抗抑郁藥物的開發(fā)過程中。這種方法已經(jīng)被用于評估多種類型的抗抑郁藥物,包括三環(huán)類藥物、選擇性血清素再攝取抑制劑(SSRI)、單胺氧化酶抑制劑(MAOI)、精神興奮藥、鎮(zhèn)定藥以及抗焦慮藥。同時實驗結(jié)果可以為神經(jīng)科學、心理學、藥物研究等領(lǐng)域提供有價值的數(shù)據(jù)和啟示。