彗星實(shí)驗(yàn)(Comet assay)也被稱為單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)(Single cell gel electrophoresis,SCGE),是一種在單細(xì)胞水平上檢測(cè)DNA損傷的技術(shù)。當(dāng)各種內(nèi)源性和外源性 DNA 損傷因子誘發(fā)細(xì)胞 DNA 鏈斷裂時(shí),其超螺旋結(jié)構(gòu)受到破壞,在細(xì)胞裂解液作用下,細(xì)胞膜、核膜等膜結(jié)構(gòu)受到破壞,細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、RNA 以及其他成分均擴(kuò)散到電解液中,而核DNA由于分子量太大不能進(jìn)入凝膠而留在原位。電泳過程中,如果DNA沒有損傷,則將停留在原位,染色后呈圓形的熒光團(tuán),無拖尾出現(xiàn)。如果DNA受損,斷裂的碎片進(jìn)入到凝膠中,在電場(chǎng)的作用下,DNA碎片離開原位向陽(yáng)極遷移,形成拖尾。DNA受損越嚴(yán)重,斷裂越多,產(chǎn)生的碎片就越多、越小,則向陽(yáng)極遷移的DNA碎片量就越多,遷移距離也越長(zhǎng),熒光染色后就能看見“彗星”樣尾長(zhǎng)并且熒光強(qiáng)度增強(qiáng)。
實(shí)驗(yàn)流程:細(xì)胞培養(yǎng)-收集樣本-鋪膠-裂解-解旋-電泳-染色-檢測(cè)-分析
服務(wù)期限: 1周
提交結(jié)果: 實(shí)驗(yàn)報(bào)告
客戶提供材料: 新鮮細(xì)胞樣本